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在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,我們會(huì)把血清作為一種添加劑加入到培養(yǎng)基當(dāng)中,從而給細(xì)胞提供更好的生長(zhǎng)環(huán)境。添加血清的培養(yǎng)基培育細(xì)胞的效果相較于未添加血清的培養(yǎng)基,可以讓細(xì)胞活率更高,生長(zhǎng)繁殖密度更大,可持續(xù)培養(yǎng)時(shí)間更長(zhǎng)。一般在細(xì)胞培養(yǎng)中添加的血清補(bǔ)充劑主要為胎牛血清和新生牛血清,因?yàn)槠渲泻屑?xì)胞生長(zhǎng)需要的各類生長(zhǎng)因子。使用血清添加在培養(yǎng)基中,也是因?yàn)檠寰哂写龠M(jìn)分化的作用,還具有轉(zhuǎn)運(yùn)運(yùn)輸?shù)墓δ?,因此在培養(yǎng)基中使用血清就可以起到一個(gè)整體優(yōu)化的作用,提高科研效率。
細(xì)胞培養(yǎng)中添加血清的作用
血清中的成分組成十分復(fù)雜,已知的成分就有上千種,主要成分主要包括血蛋白、胎球蛋白、纖連蛋白、球蛋白、α—抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、生長(zhǎng)因子、EGF、PDGF、氨基酸、脂肪酸等。血蛋白可以作為載體蛋白攜帶小分子物質(zhì)用來維持細(xì)胞生長(zhǎng),其中各類蛋白還能起到緩沖pH值等作用。雖然血清作為添加劑是對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有益的,但是也不可以盲目增加濃度。在一定范圍內(nèi),增加培養(yǎng)基中的血清濃度,可以提高細(xì)胞的分化速度,增加細(xì)胞活率,但是血清濃度過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)異常。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),在培養(yǎng)基中添加5%-20%的血清就可以滿足絕大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。細(xì)胞在含有適宜血清濃度的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí),血清中所提供的的生長(zhǎng)因子可以維持細(xì)胞的快速生長(zhǎng),對(duì)于細(xì)胞的機(jī)械損傷的阻止有一定的作用。有研究表明,培養(yǎng)基中血清含量10%時(shí)成纖維細(xì)胞形態(tài)穩(wěn)定,增殖速率比較快。當(dāng)培養(yǎng)基中血清含量達(dá)到40%時(shí),就會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損害作用,細(xì)胞數(shù)量出現(xiàn)下降的現(xiàn)象,肝細(xì)胞原代培養(yǎng)中,血清濃度達(dá)到20%時(shí)會(huì)對(duì)肝細(xì)胞造成一定傷害。
血清根據(jù)來源動(dòng)物品種不同可分為牛血清、馬血清、兔血清等。相較而言,牛血清的來源豐富,目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)。牛血清一般可以分為胎牛血清、新生牛血清和小牛血清,其中胎牛血清的品質(zhì)高,因?yàn)樘ヅ奈唇佑|過外界,血清中的有毒物質(zhì)少,所以其價(jià)格也是比較昂貴的。
胎牛血清(Fetal Bovine Serum)也稱FBS,一般是指心臟穿ci取血200-240日齡的胎牛,分離血清,過濾除菌制成。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中效果較好的天然培養(yǎng)基,可以提供細(xì)胞貼壁在培養(yǎng)瓶中所需的因子,還能起到酸堿緩沖作用。