THP-1細(xì)胞怎么培養(yǎng)？干貨

一、細(xì)胞概述：

THP-1細(xì)胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系。它來(lái)自一位急性單核細(xì)胞白血病患者的血液，有分化為多種巨噬細(xì)胞的能力，是各領(lǐng)域研究常用的細(xì)胞系之一。

THP-1  細(xì)胞的特點(diǎn)：

喜歡酸性環(huán)境

在偏酸性環(huán)境中，THP-1生長(zhǎng)更快，所以當(dāng)培養(yǎng)基稍微變黃（呈橘紅色）時(shí)，是適合細(xì)胞生長(zhǎng)的，此時(shí)補(bǔ)液或半換液即可。

有密度依賴性

THP-1細(xì)胞密度低時(shí)，生長(zhǎng)較慢，培養(yǎng)密度維持在50萬(wàn)-100萬(wàn)細(xì)胞/毫升為宜；超過(guò)200萬(wàn)/毫升則需要傳代。

二、細(xì)胞培養(yǎng)條件：

三、細(xì)胞培養(yǎng)建議：

1.細(xì)胞復(fù)蘇

將凍存管從液氮中取出后迅速放入37℃水浴鍋中搖晃解凍，準(zhǔn)備15ml離心管，將完全培養(yǎng)基移取6ml與細(xì)胞混合均勻，在1000RPM條件下離心3min，棄去上清液，再加入6ml完全培養(yǎng)基吹勻后重復(fù)離心3min，棄去上清液，補(bǔ)加6ml完全培養(yǎng)基吹勻。然后將細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶放入細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5%CO2）過(guò)夜，第二天檢查細(xì)胞密度。

2.細(xì)胞傳代

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到約8x10^5cells/ml左右時(shí)，即可進(jìn)行傳代。由于是懸浮細(xì)胞，可直接將細(xì)胞吸出，離心之后傳代。傳代Z少濃度不應(yīng)少于1x10^5 cells/ml。如果用肉眼觀察則將培養(yǎng)瓶平放靜置后觀察鏡下細(xì)胞密度達(dá)到80%，即可進(jìn)行傳代。

3.細(xì)胞凍存

50%RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 配置細(xì)胞凍存液或使用Biochannel細(xì)胞凍存液（將培養(yǎng)瓶中細(xì)胞懸液抽出，在1000RPM條件下離心3min，棄去上清液。按照需求將配置好的細(xì)胞凍存液加入離心管中吹勻細(xì)胞，再分裝凍存管中置于程序降溫盒中在-80℃冰箱中過(guò)夜，次日放入液氮中保存。

四、BioChannel 血清培養(yǎng)效果

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五、THP-1培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案

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