動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展極大的推動了現(xiàn)階段生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，此類技術(shù)目前被廣泛應(yīng)用于單克隆抗體的制備、重組蛋白藥物的研發(fā)、人造qi官移植、基因工程等行業(yè)，成為了生物制藥領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)之一。

因?yàn)樘ヅＱ逄峁┝思?xì)胞生長所需的貼壁因子、免疫球蛋白、氨基酸、脂肪酸等其他營養(yǎng)成分及細(xì)胞因子，為細(xì)胞的生長和維持提供了必要的活性成分，并且血清可以提供蛋白抑制劑，使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害，對細(xì)胞培養(yǎng)的意義重大。

無論是在單克隆抗體、ADC、細(xì)胞免疫zhi療或者是疫苗生產(chǎn)過程中都會用到胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞，以常見的293T細(xì)胞培養(yǎng)為例。其作為哺乳類細(xì)胞的篩選以及穩(wěn)定性表達(dá)細(xì)胞系，廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥各個方面，對于293T細(xì)胞培育至15代，并篩選出適用的培育方案:

培養(yǎng)條件：RPMI 1640培養(yǎng)基（BC-M-017-500mL） + 10% Fetal Bovine Serum（BC-SE-FBS01-500mL）

細(xì)胞復(fù)蘇：將含有1ml細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5ml培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心3min，棄去上清液，補(bǔ)加4-6ml完全培養(yǎng)基吹勻。然后將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中過夜，第二天檢查細(xì)胞密度并換液。

細(xì)胞傳代：當(dāng)細(xì)胞鏡下觀察匯合度達(dá)到80%-90%時，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。棄去培養(yǎng)液上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞2次。加1-2ml胰酶消化液（0.05%Trypsin-EDTA）（BC-CE-001-100mL）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，鏡下觀察細(xì)胞大部分圓縮并脫落，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶上部細(xì)胞呈掛線狀滑落，迅速拿回操作臺，于手心輕敲幾下培養(yǎng)瓶，可見細(xì)胞呈沙粒狀滑落，加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落分散后吸出，在1000RPM條件下離心3min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml吹勻。按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞重懸按1：2到1：4的比例分到新的培養(yǎng)瓶中。放入37℃、5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中，傳代結(jié)束。

不同的環(huán)境下的細(xì)胞可能會相對的誤差才會達(dá)到適條件，尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞，會需要客戶根據(jù)自己的需求來進(jìn)行微調(diào)，以保證培養(yǎng)的Z終效果。