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牛血清白蛋白,英文名稱Bovine Serum Albumin(BSA),也稱Cohn Fraction V,即第五組分(第五組分并不是BSA的一種組份,而是Edwin J.Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術(shù)得到5種組份,其中第五種就是白蛋白)。
牛血清白蛋白BSA作為牛血清中的一種白蛋白,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.43 kDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白BSA有著廣泛的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用,除在細(xì)胞培養(yǎng)中作為營養(yǎng)物添加外,牛血清白蛋白BSA主要還有以下用途:
1. 在酶切反應(yīng)體系中作穩(wěn)定劑,對酶起保護(hù)作用,并防止其分解和非特異性吸附;
2. 維持滲透壓、提供pH緩沖、起載體作用;
3. 作為蛋白定量檢測的標(biāo)準(zhǔn)品使用,如WB中的蛋白定量等;
4. 常規(guī)免疫實(shí)驗(yàn)中作封閉試劑使用,包括ELISA、WB和IHC等。
WB常規(guī)使用含蛋白比較全的脫脂奶粉來封閉,一般檢測磷酸化蛋白時(shí)更推薦用BSA(脫脂奶粉含有磷酸化蛋白可能會有干擾);常規(guī)方法封閉效果不佳時(shí)也可考慮使用BSA封閉以進(jìn)行優(yōu)化。
牛血清白蛋白BSA被廣泛用作稀釋抗體的載體蛋白以及免疫分析和免疫檢測協(xié)議中的通用阻斷劑。不含IgG的BSA也不含蛋白酶,可以緩解污染IgG可能導(dǎo)致的許多問題。