血清中解凍后會出現(xiàn)些許沉淀

沉淀主要是纖維蛋白析出，一般是解凍時溫度過高或者不正確的解凍方式造成的。血清中的此類沉淀物不會對細胞培養(yǎng)造成影響。

細胞培養(yǎng)的胎牛血清以及其它血清中可能會存在以下種類的沉淀物：

纖維蛋白，它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達到1-2mm，可以用肉眼觀察到。因為血清都是在低溫下進行收集和快速處理的。

磷酸鈣，它也是常見的一種沉淀物，通常會使血清出現(xiàn)渾濁，并且在37°C培養(yǎng)的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點，這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動，因此經(jīng)常被誤認為是微生物污染。

膽固醇、脂肪酸酯以及一些不溶性脂蛋白質(zhì)。它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因之一。

沉淀去除方法建議

通常以上這些沉淀物不會影響血清的品質(zhì)，，如果您希望除去這些沉淀物，可以將血清轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，一400g進行離心，離心后將上清液加入預(yù)過濾培養(yǎng)基直接使用即可。不建議您以過濾的方法除去這些絮狀沉淀物，因為它們可能會阻塞您的過濾膜。

血清分裝的小技巧

血清分裝要提前準備好無菌分裝瓶并在無菌環(huán)境下進行，因為血清在冷凍后體積會膨脹，所以需要在分裝前預(yù)留下空間，以免造成血清膨脹導(dǎo)致瓶體破裂從而造成污染。

血清中補體對于細胞培養(yǎng)的影響

補體是一種血清蛋白質(zhì)，存在于人和脊椎動物血清及組織液中，不耐熱，可組成龐大的補體系統(tǒng)，可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)。激活的補體參與溶解細胞過程，刺激平滑肌收縮、細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。、

不同批次血清顏色為什么有差異？

血清中含有微量的血紅蛋白，與采集血液過程中細胞的破裂數(shù)目有關(guān)。只要血紅蛋白的含量在藥典規(guī)定范圍內(nèi)，顏色的深淺和血清品質(zhì)無關(guān)，不影響細胞培養(yǎng)。國家藥典規(guī)定≤20mg/dL。