1、首先根據(jù)您的細胞類型選擇對應適合您的胎牛血清

2、胎牛血清使用注意事項：

(1)客戶收到貨后的第1時間需確認胎牛血清有無異常，如血清有沒有出現(xiàn)融化情況、瓶口及瓶身有無出現(xiàn)碎裂、瓶口是否密封完整等情況。

(2)剛到貨的血清，檢查無異常后需及時放進-20℃冰箱中，避免反復凍融。

(3)血清融化方法：建議產(chǎn)品使用梯度溶解法，將血清從-20℃冰箱取出后，于2-8℃解凍過夜，并在此過程中不時輕輕搖動使之溶解均勻。

(4)血清不宜 4℃甚至更高溫度長期保存，切忌反復凍融，少量使用時建議分裝凍存。（整個操作需在無菌操作臺中進行，注意無菌操作。）血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此在分裝血清時須預留一定體積，否則易導致分裝瓶凍裂而發(fā)生污染。

(5)解凍后的血清沉淀物一般是由于血清中纖維蛋白及脂蛋白變性所造成，不影響使用。去除這些絮狀沉淀物可以通過3500rpm離心5分鐘去除，但不宜過濾去除，因為絮狀物可能阻塞濾膜。

(6)血清滅活：Biochannel胎牛血清未進行過熱滅活處理，客戶如需熱滅huo血清，可自行操作處理。滅活條件為水浴溫度56℃，30min。（請客戶根據(jù)自身需求選擇是否需要對血清進行滅活處理。）

(7)更換血清：我們建議客戶在品牌血清替換時，先提取一部分細胞進行試用，并且按照比例替換血清，原血清與替換血清比例：3:1→1:1→1:3比例進行。

 

3、胎牛血清試用后常見的問題

細胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的黑點是污染嗎？

更換血清后發(fā)現(xiàn)細胞鏡下觀察有黑點，需要肉眼觀察細胞培養(yǎng)液有無混濁的情況出現(xiàn)，其次鏡下觀察細胞中的黑點是否有游動。如果細胞被污染，微生物則會大量繁殖，培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。

如果在鏡下觀察細胞，生長狀態(tài)良好，與黑點出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關：

(1)細胞生長過老，破碎的細胞殘骸;

(2)血清等級不足以維持良好的細胞生長;

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細胞生長;

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格。

(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。

 

更換血清后細胞出現(xiàn)死亡？

培養(yǎng)細胞的死亡原因有多種情況，常見的有以下幾種：

(1)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動過大；

(2)細胞在凍存或復蘇過程中損傷；

(3)培養(yǎng)液滲透壓不正確；

(4)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；

(5)胰蛋白酶消化過度；

(6)微生物污染；

(7)細胞在傳代時未計數(shù)、計活率，可能導致細胞接種密度過低或過高不能正常鋪瓶生長。

 

臍帶間充質(zhì)干細胞原代培養(yǎng)，細胞出現(xiàn)裂解死亡？

從細胞圖片分析，客戶在原代分離組織初期未見細胞爬出、或有零星細胞生長，未見細胞集落，建議客戶對原代分離的操作步驟做排查。

為什么神經(jīng)母細胞瘤培養(yǎng)，增殖慢，細胞易飄起？

該客戶試用的是優(yōu)級胎牛血清，根據(jù)神經(jīng)類細胞的分型建議以及客戶之前使用的是GIBCO澳胎血清培養(yǎng)，還是建議用客戶試用特級胎牛血清對細胞進行培養(yǎng)。

 

為什么增加抗sehng素濃度后，細胞生長較慢？

乳腺ai細胞傳至4代后增殖較慢，前期生長不錯，增長1天左右可繼續(xù)傳代，細胞狀態(tài)良好。增加抗sheng素濃度后，細胞生長較慢。

建議在排除污染情況下，降低抗sheng素濃度，從消化、傳代是否過密、細胞狀態(tài)不佳或老化等方面排查原因。

 

為什么細胞有大量聚團現(xiàn)象？

客戶培養(yǎng)HT22鼠源神經(jīng)細胞，特級血清培養(yǎng)，細胞生長正常，但總是細胞有大量聚團現(xiàn)象。

細胞生長容易聚團建議客戶從傳代時胰酶消化不當、細胞生長特性、血清是否存在批間差以及有無可能是輕度gan染支原體等方面排除。排查了因消化原因、細胞特性等原因，疑似支原體導致的細胞聚團，添加了支原體清除劑，使用3天，聚團現(xiàn)象好轉(zhuǎn)，停用就反復。建議繼續(xù)使用支原體清除劑穩(wěn)定一周后在停用觀察細胞狀態(tài)。

胎牛血清/細胞培養(yǎng)基/細胞培養(yǎng)

細胞培養(yǎng)相關產(chǎn)品可咨詢杭州昊鑫生物：400-861-5108/15906629305